Comparação de três métodos para determinação de clorofila: espectrofotometria e fluorimetria em amostras contendo mistura de pigmentos e espectrofotometria em amostras com pigmentos separados através de cromatografia liquida de alta precisão

DOS SANTOS1, A.C.A., CALIJURI2, M.C., MORAES2, E.M., ADORNO2, M.A.T., FALCO, P.B.2 , CARVALHO2, D.P., DEBERDT2, G.L.B. & BENASSI2, S.F.

1 Faculty of Biology. University of Santo Amaro. R. Enéas de Siqueira Neto, 340. São Paulo, S.P. andrecas@terra.com.br

2 University of São Paulo. School of Engineering at São Carlos. Department of Hydraulic and Sanitation. Laboratory of Biotoxicology in Continental Waters and Sewage (BIOTACE) and Laboratory of Anaerobic Processes, Av. Trabalhador Sãocarlense, 400. São Carlos, S.P. calijuri@sc.usp.br

RESUMO: A concentração da clorofila a é uma das formas mais utilizadas para determinar-se a biomassa de organismos fitoplanctônicos. Apesar da concentração dessa substância variar em função do estado fisiológico das células e da composição de espécies, ela permite avaliar mais rapidamente a biomassa de organismos fitoplanctônicos no ambiente, que métodos mais diretos de microscopia, tornando-se uma ferramenta útil em estudos científicos e de monitoramento de recursos hídricos. Em função da ampla utilização, vários métodos foram propostos para determinação da concentração de clorofila-a, com diferentes formas de extração e de quantificação. O presente trabalho compara as diferentes formas de quantificação da concentração de clorofila-a: espectrofotometria, fluorimetria e espectrofotometria após separação por cromatografia líquida de alta precisão (HPLC). Para comparar os três métodos foram utilizadas 120 amostras, de dois ambientes: Reservatório do Lobo e de Salto Grande. Apesar dos métodos terem uma correlação muito grande, tanto a espectrofotometria quanto a fluorimetria superestimaram a concentração de clorofila a. Esta superestimação é mais significativa no reservatório do Lobo.

Palavras-chave: clorofila, fitoplâncton, espectrofotometria, fluorimetria, HPLC

 

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